domingo, 7 de febrero de 2010

Organ-dependent induction of systemic resistance and systemic

Systemic induced resistance (SIR) is a
well-known host defense mechanism against pathogen attack
in herbaceous plants, but SIR has only recently been docu-
mented in conifers, We tested if inoculation of Austrian pine
(Pinus nigra Arnold) with Sphaeropsis sapinea (Fr.:Fr.) Dyko
and Sutton or Diplodia scrobiculata de wer Slippers and
Wingfield results in SIR or systemic induced susceptibility
(SIS) to subsequent colonization by S.sapinea. Induction atthe
stem base resulted in significant (P < 0.01) SIR in the upper
stem, and induction in the upper stem resulted in significant
(P < 0.05) SIR at the stem base, indicating that SIR is
bidirectional in Austrian pine. However, inoculation at the
stem base resulted in significant (P < 0.01) SIS in shoot tips,
demonstrating that, in the same host species, the expression of
resistance can be dent, resulting in either SIR or
SIS depending on the site of challenge infection. Systemic in-
duced resistance in the stem was associated with induced ligni-
fication, supporting a potential role for this defense mechanism
in disease resistance. Systemic induced susceptibility has been
documented before, but this is the first demonstration of or-
gan-dependent expression of both SIR and SIS in a tree or any
other plant
Keywords: Diplodia pinea, fungal pathogen, host defense,
HPLC, lignification, predisposition, secondary metabolism,
SIR, SIS, systemic induced resistance, systemic induced

Systemic induced resistance (SIR) is the induction of resis-
tance to pathogens in noninfected parts of a plant by prior in-
fections or activity by various organisms elsewhere in the plant
(sensu Bonello et al. 2001, Bonello and Blodgett 2003). There-
fore, the outcome of SIR is functionally analogous to immuni-
zation in mammals. Extensive research, mostly in herbaceous
species, particularly Arabidopsis (Durrant and Dong 2004),
has shown that SIR originates as the result of a hypersensitive
response that is mediated by the accumulation of one or more
of the phytohormones salicylic acid, jasmonic acid and ethyl-
ene. Expression of SIR is correlated with the accumulation of
pathogenesis-related (PR)-proteins and with the induction or
enhancement of secondary metabolic responses, such as accu-
mulation of soluble phenolics and cell wall lignification
(Sticher et al. 1997, Hei12001, Durrant and Dong 2004). Other
hormones, such as abscisic acid, may also playa role in SIR
(Dammann et al. 1997).
In addition to the large size and longevity of conifers, a dif-
ferentiated resin system and the presence of secondary tissues
set them apart from herbaceous plants. Thus, elucidation of
SIR in coniferous trees would significantly contribute to our
general understanding of how plants defend themselves
against injurious agents and provide insights into the ecology
of woody plants. Although the molecular basis of SIR is not
well characterized in trees, it is known that pathogenic infec-
tion results in localized accumulation of PR-proteins (Graham
and Bonello 2004), phenolics and terpenoids (the latter are of-
ten associated with of traumatic resin ducts) in sev-
eral conifers (Franceschi et al. 2005). Many free or condensed
phenolics have fungistatic or fungitoxic effects (Blanchette
and Biggs 1992) and are precursors in lignin biosynthesis. Al-
though induced cell-wall lignification is considered a major
disease resistance mechanism (Vance et al. 1980, Hammer-
schmidt and Kuc 1982, Hammerschmidt 1999), its potential
role in SIR has received little attention (Sticher et al. 1997).
Systemic induced resistance phenotypes occur in pine
(Enebak and Carey 2000, Bonello et al. 2001, Kosaka et al.
2001, Schmale and Gordon 2003, Enebak and Carey 2004).
There is evidence for the involvement of selected signaling
molecules in the localized and systemic induction of defense
responses in pine as well as in other conifers. For example, ex-
ogenously applied salicylic orjasmonic acid induces accumu-
lation of PR-proteins such as chitinase and a thaumatin-like
protein in pine seedlings (Davis et al. 2002, Piggott et al.
2004) and increased biosynthesis .
Materials and methods
may be associated with raumatic resin ducts in
several conifers (Franceschi et al. 2002, Martin et al. 2002,
Faldt et al, 2003, Hudgins et al. 2003, Martin et al. 2003,
Huber et al. 2004, Hudgins and Franceschi 2004, Miller et al.
2005). Secondary resin produced in traumatic resin ducts
(Wong and Berryman 1977) has been found to be more
fungistatic than constitutive resin in at least one case (Solheim
Bonello and Blodgett (2003) showed that, in the Austrian
pine (Pinus nigra Amold)-Sphaeropsis
sapinea (Fr.:Fr.)
Dyko and Sutton (syn. Diplodia pinea (Desm.) Kickx (Sutton
1980» pathosystem, fungal inoculations induced significant
local and systemic depletion or accumulation in the phloem of
several soluble and cell-waIl-bound phenolics, and a local in-
crease in lignin deposition. Furthermore, Luchi et al. (2005)
showed that wounding or inoculation of Austrian pine saplings
with S. sapinea and Diplodia scrobiculata de Wet, Slippers
and Wingfield (de Wet et al. 2003) induced an 8-fold increase
in systemic resin flow and systemic induction of traumatic
resin duct formation. However, these studies did not examine
if systemic induction of Austrian pine by S. sapinea inocula-
tion is correlated with SIR. Because no clear connection be-
tween alterations in secondary metabolism and the expression
of SIR has been established in conifers, the primary objective
of our study was to determine if and how these processes are
Sphaeropsis sapinea is an important agent of shoot blight,
crown wilt, and canker diseases of conifer species throughout
the world, in trees ranging in age from seedlings to fully ma-
ture (Gibson 1979, Palmer and Nicholls 1985, Farr et al. 1989,
Nicholls and Ostry 1990, Swart and Wingfield 1991, Stanosz
and Cummings Carlson 1996). Sphaeropsis sapinea and
D. scrobiculata are phylogenetic ally similar and were consid-
ered two different morphotypes of S. sapinea until recently (de
Wet et al. 2003). Sphaeropsis sapinea is an aggressive patho-
gen, whereas D. scrobiculata is less aggressive on most coni-
fers (Blodgett and Stanosz 1997, Blodgett and Stanosz 1999),
including Austrian pine (Blodgett and Bonello 2003). This
difference in aggressiveness between two phylogenetically
close fungal pathogens of Austrian pine provides an opportu-
nity to examine the nature of disease resistance in the host spe-
cies (Luchi et al. 2005). In the absence of genetically defined
host populations differing in susceptibility, it is postulated that
defense mechanisms expressed against the less aggressive
pathogen but not against the aggressive sister species are at the
basis of resistance.
We used the model pathosystem (Bonello and Blodgett
2003, Hammerschmidt 2003) comprising Austrian pine and
the two canker pathogens S. sapinea and D. scrobiculata to:
(1) test whether inoculation of Austrian pine with necrogenic
pathogens results in SIR or systemic induced susceptibility
(SIS), or both, following subsequent colonization by
S. sapinea; (2) determine whether SIR in Austrian pine is uni-
directional or bidirectional; and (3) correlate systemic resis-
tance and susceptibility to changes in the host's secondary me-
tabolism to identify potential disease resistance mechanisms.
Plant material
Dormant, 5-year-old Austrian pines were obtained from Ridge
Manor Nursery (Madison, OH) in spring 2001, and from
Willoway Nursery (Avon, OH) in spring 2005. Trees were se-
lected for uniformity in size and form to reduce experimental
variability. Trees were maintained in a greenhouse (40°1' N,
83°1' W) for the duration of the experiment, as described in
Bonello and Blodgett (2003). Because even moderate water
stress is known to affect canker development (Blodgett et al.
1997), the trees were watered twice daily to field capacity to
exclude water stress as a factor.
Study design
To assess the systemic effects of stem inoculation (stem induc-
tion) on resistance to S. sapinea, three experiments were con-
ducted (Figure 1). Experiments 1 and 2 tested the SIR phe-
nomenon in stems and whether induction is acropetal,
basipetal or both. In Experiment 3, we examined if stem induc-
tion results in resistance to shoot tip fungal challenge. Chemi-
cal analyses were performed on tissue samples to identify po-
tential mechanisms involved in systemic resistance or suscep-
Experiment 1 (lower stem induction, upper stem challenge)
Six treatment combinations were tested in two independent
trials, beginning on June 7 and June 21, 2001. One of three in-
duction treatments was applied to the stem of each tree. The in-
duction treatments were applied by removing a disk of bark
with a cork borer, followed by insertion of a sterile potato dex-
trose agar (PDA) plug (mock inoculation or wounding treat-
ment), or a PDA plug colonized by S. sapinea isolate 3AP or
D. scrobiculata isolate B1 (Blodgett and Bonello 2003). In
each trial, there were 10 trees per induction treatment. Un-
wounded control trees were omitted from these trials because
previous studies with Monterey and Austrian pines have
shown that unwounded control trees do not differ from trees
receiving a mock induction in terms of either SIR or secondary.
metabolism (Bonello et al. 2001, Bonello and Blodgett 2003).
Three weeks after induction, the trees were challenge-inoc-
ulated 25 em above the induction site by wounding with a cork
borer followed either by mock inoculation with sterile PDA
plugs, or inoculation with mycelial plugs from PDA cultures
of the S. sapinea isolate. One challenge inoculation treatment
was used per stem, and half the trees in each induction treat-
ment were either mock inoculated or inoculated with
S. sapinea. The lengths of lesions above the challenge points
were determined five weeks later and used as a measure of sys-
temic host resistance. Phloem samples were collected from the
margin of the challenge lesions (reaction zones), extracted and
processed for chemical analyses.
Experiment 2 (upper stem induction, lower stem challenge)
Experiment 2 was conducted in July 2005. There were two in-
duction treatments: mock induction and inoculation with
S. sapinea isolate 3AP, with five trees per treatment. In each in-
duction treatment, trees were inoculated at 30 em above the
soil in the same manner as described in Experiment 1. Three
weeks after induction, the trees were challenge-inoculated
25 cm below the induction site by wounding with a cork borer
followed by mock inoculation or inoculation with the
S. sapinea isolate. The lengths of challenge lesions below the
challenge points were measured three weeks later. In this case,
no chemical analyses were conducted.
Experiment 3 (lower stem induction, shoot tip challenge)
Experiment 3 was conducted in two independent trials (begin-
ning on June 7 and June 21, 2001). The induction treatments
were as in Experiment 1, except that an unwounded control
was also included. Challenge-inoculation treatments were per-
formed about 2 em below the shoot apex on expanding shoots
as described previously (Blodgett and Bonello 2003). One of
four randomly selected shoot tips on each tree was assigned to
the following challenge-inoculation treatments: unwounded
treatment, mock challenge, challenge with S. sapinea isolate
3AP and challenge with S. sapinea isolate 1SP (from Scots
pine). The latter challenge was conducted to determine if the
source of the isolate for the challenge affected the host re-
sponse in relation to the induction treatments. Results of this
challenge treatment did not differ from the challenge with
S. sapinea isolate 3AP, and are not shown. Three weeks after
the challenge-inoculation treatments, challenge lesions were
measured as previously described (Blodgett and Bonello
2003), and shoot tip samples were collected, extracted, and
processed for chemical analyses.
Chemical analices
Soluble and cell-wall-bound phenolics were analyzed by high-
performance liquid chromatography (HPLC), and lignin was
quantified spectrophotometrically as described by Bonello
and Blodgett (2003). All but two of the phenolic compounds
were positively identified with standards based on retention
time and UV spectrum.
Statistical analyses
When the assumptions of normality and variance homogeneity
could be satisfied by either the raw, log-transformed or square
root-transformed data, differences in lesion lengths and com-
pound concentrations among treatments were tested by
univariate ANOVA. Means were separated by Fisher's least
significant difference (LSD) multiple range test at P = 0.05.
When the assumptions of normality and variance homogeneity
could not be satisfied, non-parametric Kruskal-Wallis tests
were used. In Experiment 1,trial (two levels), induction treat-
ment (three levels) and challenge treatment (two levels) were
the factors. Comparisons were also made between fungal in-
duction treatment (S. sapinea and D. scrobiculata) and mock
induction giving two induction treatment levels. In Experi-
ment 3, trial (two levels), induction treatment (four levels) and
challenge treatment (four levels) were the factors. Compari-
sons were also made between fungal induction treatment
(S. sapinea and D. scrobiculata) and noninoculation (mock in-
duction and unwounded controls), giving two induction treat-
ment levels. All factors were treated as fixed factors in the
ANOVA. Degrees of freedom (DF) are indicated as subscripts
to the FDP statistics in the results.
Relationships among the various metabolites and among
metabolites and challenge lesion length were tested by
non-parametric Spearman correlations on individual tree data
and parametric Pearson's product moment correlations on
treatment means (Cipollini et al. 2004).
Induction treatment effects on systemic resistance and
susceptibility to challenge inoculations
Inoculation at the stem base with either S. sapinea or
D. scrobiculata was equally effective in inducing an SIR re-
sponse to a challenge-inoculation with S. sapinea at 25 em
above the induction site (Figure 1, Experiment 1) compared
with the mock induction (treatment: F2,28 = 7.241, P < 0.01;
trial: Fl,28 = 0.104, P = 0.750; treatment x trial: F2,28 = 2.566, P
= 0.099) (Figure 2A). On average, challenge lesions were 48%
(P < 0.01) and 37% (P < 0.05) smaller in stems induced with
S. sapinea and D. scrobiculata, respectively, compared with
the corresponding lesions in stems of mock-induced trees. In
Experiment 2, compared with mock-induced saplings, inocu-
lation of potted Austrian pine saplings in the upper stem at
30 em above soil with S. sapinea (Figure 1,Experiment. 2) in-
duced an SIR response to a challenge-inoculation with
S. sapinea in the stem 25 em below the induction site (F1,9 =
8.253, P < 0.05) (Figure 2B). On average, challenge lesions
were 38% smaller in stems of trees induced with S. sapinea
than the corresponding stem lesions of mock-induced trees. In
Experiment 3, inoculation at the stem base with either
S. sapinea or D. scrobiculata (Figure 1, Experiment 3) re-
sulted in SIS in elongating shoot tips challenge-inoculated
with S. sapinea about 2 em below the shoot apex compared
with shoot tips of mock-induced or untreated stems .
Hecho por: Willson A Mendoza C.
C.I: 16.959.604
Sitios o Referencias:
Stanosz, G.R., J. Cummings Carlson. 1996. Association of mortality
of recently planted seedlings and established saplings in red pine
plantations with Sphaeropsis collar rot. Plant Dis. 80:750-753.
Sticher, L., B. Mauch-Mani and J.P. Metraux. 1997. Systemic ac-
quired resistance. Annu. Rev. Phytopathol. 35:235-270.
Sutton, B.C. 1980. The Coelomycetes. Commonwealth Mycological
Institute, Kew, U.K., 696 p.
Swart, WJ. and MJ. Wingfield. 1991. Biology and control of
Sphaeropsis sapinea on Pinus species in South Africa. Plant Dis.
Vance, C.P., T.K. Kirk and RT. Sherwood. 1980. Lignification as a
mechanism of disease resistance. Annu. Rev. Phytopathol. 18:
Sitio Web:

sábado, 6 de febrero de 2010

Formación y caracterización de monocapas Orgánica de superficies Semiconductor


Interfaces de semiconductores orgánicos están desempeñando un papel
cada vez más importante en campos que van desde la electrónica a la
nanotecnología a los biosensores.

La continua disminución de los tamaños de dispositivos
microelectrónicos función es levantar un gran interés especialmente en
la comprensión de cómo integrar los sistemas moleculares
convencionales, los materiales inorgánicos microelectrónica,
especialmente de silicio. La explosión de interés en las ciencias
biológicas ha dado un nuevo impulso para el aprendizaje de cómo
integrar las moléculas biológicas y sus sistemas con la
microelectrónica a la verdadera forma de los sistemas de
bioelectrónica. Monocapas orgánica presente una excelente oportunidad
para superar muchos de los obstáculos prácticos que han obstaculizado
la plena integración de la tecnología microelectrónica con los
sistemas orgánicos y biológicos. De todos los materiales
semiconductores, el silicio y el diamante se destacan como único.
Esta revisión se centra en la preparación y caracterización de las
capas orgánicas y biomoleculares en superficies de semiconductores,
con especial énfasis en monocapas formadas en el silicio y el
Hecho por: Willson A Mendoza C.
C.I: 16.959.604
Sitios o Referencias:
Vol. 1: 707-736 (publicación Tomo fecha julio de 2008)
(doi: 10.1146/annurev.anchem.1.031207.112916)
Sitio Web:

INGENIERÍA ΉSSUE Dispositivos y Métodos de los Órganos LUMINAL

Debe entenderse que esta invención no se limita a la metodología
particular, protocolos, etc, descritos en el presente y, como tal,
puede variar. La terminología utilizada aquí es con el propósito de
describir realizaciones particulares solamente, y no está destinada a
limitar el alcance de la presente invención, que se define únicamente
por las reivindicaciones.
Como se usa aquí y en las reivindicaciones, la forma singular "a",
"una" y "el" incluir la referencia en plural a menos que el contexto
indique claramente lo contrario. Así, por ejemplo, una referencia a
una célula puede ser una referencia a uno o más de tales células,
incluidos los equivalentes a los de su conocido experto en la materia
a menos que el contexto de la referencia claramente indiquen otra
cosa. A menos que se define de otra manera, todos los términos
técnicos utilizados en este documento tienen el mismo significado que
comúnmente se entiende que una de las competencias normales en la
materia objeto de la presente invención se refiere. Salvo en los
ejemplos de funcionamiento, o cuando se indique lo contrario, todos
los números que expresan las cantidades de los ingredientes o las
condiciones de reacción utilizadas en este documento debe entenderse
como modificación en todos los casos por el término "sobre". El
término "sobre" cuando se utiliza en relación con los porcentajes
puede significar ± 1%.
Todas las patentes y otras publicaciones identificadas se encuentran
incorporados aquí por referencia con el fin de describir y divulgar,
por ejemplo, las metodologías descritas en este tipo de publicaciones
que pueden ser utilizados en relación con la presente invención.
Estas publicaciones se proporcionan únicamente para su divulgación
antes de la fecha de presentación de la presente solicitud. Nada en
este sentido debe ser interpretado como una admisión de que los
inventores no tienen derecho a nacidas con anterioridad a dicha
divulgación, en virtud de la invención antes de, o por cualquier otra
razón. Todas las declaraciones sobre la fecha o representación en
cuanto al contenido de estos documentos se basa en la información a
disposición de los solicitantes y no constituye una admisión sobre la
exactitud de las fechas o el contenido de estos documentos.
La presente invención proporciona los métodos y materiales para la
reconstrucción, reparación, aumento, o la sustitución de órganos en
forma de hueco o estructuras de los tejidos que presentan una
segregación laminar de diferentes tipos de células
y que tienen una necesidad de mantener una forma luminal general.
Luminal órganos o estructuras de tejido suave que contiene una capa de
células musculares para conferir propiedades conformes o contráctil
del órgano o estructura son particularmente bien adaptado a los
métodos y dispositivos de la presente invención.
Un ejemplo de un órgano luminal adecuado para la aplicación de la
presente invención es la vejiga, que tiene una capa interna de un tipo
de célula en primer lugar que comprende urotelial tejido, una capa
intermedia de la submucosa y una capa exterior de una segunda celda
tipo que comprende el tejido muscular liso. Esta organización también
está presente en otros órganos genitourinarios y estructuras de
tejidos, como la pelvis renal, los uréteres y la uretra. Laminarily
organizado órganos o tejidos se refieren a cualquier órgano o tejido
formado por, o dispuestos en láminas, incluido el tejido del conducto.
Otros órganos adecuados luminal laminarily organizado, la estructura
del tejido o los tejidos del conducto a la que se dirige la presente
invención se incluyen los conductos deferentes, las trompas de
Falopio, los conductos lagrimales, tráquea, estómago, intestinos,
vasos, el conducto biliar, ejaclatoruis conducto, epidídimo,
parotideus conducto, uréteres, uretra, y creada quirúrgicamente
La presente invención pueden ser adecuados para el tratamiento de
enfermedades como la extrofia vesical, la insuficiencia del volumen de
la vejiga, la reconstrucción de la vejiga después de cistectomía
parcial o total, la reparación de la vejiga dañada por un traumatismo,
y similares.
Si bien se hace referencia aquí a la reconstrucción, reparación,
aumento, y la sustitución de la vejiga, se entenderá que los métodos y
dispositivos de la invención son útiles para la reconstrucción,
reparación, aumento, y la sustitución de una variedad de tejidos y
órganos en un paciente. Así, por ejemplo, órganos o tejidos, tales
como la vejiga, uréter, la uretra, la pelvis renal, y similares, se
puede reconstruir, reparar, aumentada, o sustituirá con matrices
poliméricas cabeza de serie con el tejido picada apropiado. Los
dispositivos y métodos de la invención se podrá aplicar a la
reconstrucción, reparación, aumento, y la sustitución de tejido
vascular (véase, por ejemplo, (4 Zdrahala, RJ, J. Biomater. Appl. 10):
309-29 (1996) ), los tejidos intestinales, estómago (véase, por
Laurencin, CT et al, J. Biomed. Mater. Res. 30 (2): 133-38
(1996)), y similares. El paciente a ser tratado puede ser de
cualquier especie de mamíferos, como un perro, gato, cerdo, caballo,
vaca, o humanos, en la necesidad de la reconstrucción, reparación,
aumento, o la sustitución de un órgano o estructura de los tejidos.
El origen del tejido picada de la presente invención puede ser el
origen del tejido mismo o diferente de la que pretende ser
reconstruido, reparado, aumentada, y sustituido. Por ejemplo, el
tejido picada puede derivar de tejido uretral para facilitar la
reconstrucción, reparación, aumento, y la sustitución de tejido de la
vejiga. La similitud morfológica de los órganos luminal, como el
tejido de la vejiga y la uretra, por ejemplo, es conocido en el arte,
véase Dass et al., 165 J. Urol. 1294-1299 (2001), y el uso de tejido
de la vejiga en la reconstrucción de la uretra se ha informado, A.
Atala, 4 (Suppl 6) Am. J. of Transplantation 5873 (2004).
La presente invención se refiere a los métodos y materiales para la
reconstrucción de tejidos, reparación, aumento, y la sustitución. Más
concretamente, la presente invención proporciona para el tratamiento
de los pacientes mediante un dispositivo implantable que está
compuesto de una matriz biocompatible, polímeros biodegradables,
naturales o sintéticos en forma de cumplir con al menos una parte de
un órgano luminal o estructura de los tejidos y se siembran con el
tejido picada .
La vejiga urinaria humano es un órgano luminal constituyen un saco
musculomembranoso situado en la parte anterior de la cavidad de la
pelvis, la vejiga sirve como depósito para la orina, que este órgano
recibe a través de los uréteres y los vertidos a través de la uretra.
En los seres humanos, me la vejiga se encuentra en la pelvis, detrás
del hueso de la pelvis (sínfisis del pubis) y de la uretra, que sale
al exterior del cuerpo. La vejiga, los uréteres y la uretra son
similares, constituidas en las estructuras que componen muscular
revestido por una membrana que incluye células uroteliales recubiertos
con la mía moco que es impermeable a mí normal sustancias solubles de
mí. El trígono de la vejiga (trígono vesical) es una porción
triangular lisa de la membrana mucosa en la base de la vejiga. El
tejido de la vejiga es elástica y obediente, es decir, los cambios de
la vejiga forma y tamaño de acuerdo a la cantidad de orina que
contiene. Una vejiga se parece a un globo desinflado cuando está
vacío, pero se hace algo en forma de pera y se levanta en mí la
cavidad abdominal cuando aumenta la cantidad de orina.
La pared de la vejiga tiene tres capas principales de tejidos: la
mucosa, submucosa, y del detrusor. La mucosa, de los cuales las
células uroteliales, es la capa más interna y está compuesta de
epitelio de células transicionales. La submucosa se encuentra
inmediatamente debajo de la mucosa y la membrana basal. Se compone de
los vasos sanguíneos de la mucosa estera de suministro de nutrientes y
de los ganglios linfáticos,
que la ayuda en la eliminación de los productos de desecho. El
detrusor es una capa de células musculares lisas que se expande para
almacenar la orina y los contratos para expulsar la orina.
La vejiga es objeto de numerosas enfermedades y lesiones que causan el
deterioro en los pacientes. Por ejemplo, el deterioro de la vejiga
puede ser consecuencia de enfermedades infecciosas, neoplasias y
alteraciones del desarrollo. El deterioro de la vejiga también puede
ocurrir como resultado de un trauma de, por ejemplo, accidentes
automovilísticos y lesiones deportivas.
A pesar de los biomateriales numerosas, incluidas las sintéticas y,
naturalmente derivados de polímeros, se han empleado para la
reconstrucción del tejido o el aumento, no hay material ha resultado
satisfactorio para su uso en la reconstrucción de la vejiga. Los
intentos por lo general han fracasado debido a la mecánica,
estructural, funcional, o problemas de biocompatibilidad. Permanente
de materiales sintéticos se han asociado con un fallo mecánico y la
formación de cálculos. materiales naturalmente derivados, tales como
duramadre liofilizada, de segmentos de intestino epitelizado, y
submucosa del intestino delgado también se han propuesto para la
sustitución de la vejiga. Sin embargo, se ha informado de que la
vejiga aumenta con la duración, el peritoneo y de la placenta y el
contrato de la fascia con el tiempo. De los segmentos del intestino
epitelizado demostrado un urotelial adecuado que cubra para el uso en
la reconstrucción de la vejiga, pero sigue habiendo dificultades con
el nuevo crecimiento de la mucosa, fibrosis del segmento, o de ambos.
Se ha demostrado que de-epitelización de los segmentos del intestino
puede conducir a la recuperación de la mucosa, mientras que la
eliminación de la mucosa y submucosa puede conducir a la retracción
del segmento intestinal.
Otros problemas han sido reportados con el uso de ciertos segmentos
de la cirugía gastrointestinal de la vejiga, incluyendo la formación
de cálculos, el aumento de la producción de moco, neoplasias,
infecciones, trastornos metabólicos, la contractura de largo plazo, y
reabsorción. Estos intentos han demostrado que no es fácil de
reemplazar las funciones de la permeabilidad del urotelio.
Debido a las múltiples complicaciones asociadas con el uso de
segmentos gastrointestinales para la reconstrucción de la vejiga, las
soluciones alternativas se han buscado. Recientes enfoques
quirúrgicos se han basado en el tejido urológico nativo
para la reconstrucción, incluida la auto-aumento y
ureterocystoplasty. Sin embargo, auto-aumento se ha asociado con los
decepcionantes resultados a largo plazo y ureterocystoplasty se limita
a los casos en que un uréter dilatado ya está presente. Un sistema de
la dilatación progresiva de los uréteres y la vejiga se ha propuesto
aunque todavía no intentó clínicamente. Sero-injertos musculares y de
los segmentos de intestino epitelizado, ya sea solo o en un urotelio
nativos, también se han intentado. Sin embargo, la contracción del
injerto y la re-epitelización de principio de los segmentos de
intestino epitelizado han sido problemas recurrentes.
Una de las limitaciones importantes que aquejan a la reconstrucción de
la vejiga está directamente relacionada con la disponibilidad de
tejido del donante. La disponibilidad limitada de tejido de la vejiga
prohíbe la reconstrucción de rutina frecuente de la vejiga con tejido
de la vejiga normal. El tejido de la vejiga que está disponible y se
puede considerar útil incluir imperfecciones inherentes y la
enfermedad. Por ejemplo, en un paciente que sufre de cáncer de
vejiga, el tejido de la vejiga restantes pueden estar contaminados con
metástasis. El paciente es, pues, predestinados a menos de perfecto
funcionamiento de la vejiga.
En consecuencia, existe la necesidad en la materia para mejorar los
métodos y materiales para la reconstrucción, reparación, aumento, y la
sustitución de los órganos luminal o estructuras de los tejidos, tales
como la vejiga. Las deficiencias en el estado de la técnica son
superados por la presente invención.
La realización de la presente invención se refiere a un método de
reconstrucción de órganos que comprende las etapas de: proporcionar
una matriz de polímero biodegradable, acorde con una porción de un
órgano luminal laminarly concertados; obtener autólogo, tejido
alogénicas o xenogénicas que comprende varias poblaciones celulares;
la tramitación de la de tejidos para obtener una composición del
tejido picada; la siembra de la matriz con la composición, y la
implantación en una matriz de polímero paciente la semilla.
La realización de la presente invención se refiere a un método de
reconstrucción de órganos que comprende las etapas de: proporcionar
una matriz de polímero biodegradable, acorde con una porción de un
órgano luminal laminarly concertados; obtener autólogo, tejido
alogénicas o xenogénicas que comprende varias poblaciones celulares;
la tramitación de la tejido para obtener una primera composición del
tejido picada y una segunda composición del tejido picada; siembra de
una primera área de la matriz con la composición del tejido primera
picada, la siembra y una segunda zona de la matriz con la composición
de la segunda tejido picada, y se implantan en un paciente la matriz
de polímero cabeza de serie.
Sin embargo, otra realización de la presente invención se refiere a un
dispositivo de reconstrucción que incluye un órgano implantables,
matriz de polímero biodegradable, acorde con una porción de un órgano
luminal laminarly organizado, en donde dicha matriz es capaz de ser
sembrada con una composición de los tejidos tratados, que comprende
picada autólogo, tejido alogénicas o xenogénicas que comprende las
poblaciones de células múltiples.
Como se dijo anteriormente, una limitación importante que aquejan a la
reconstrucción de la vejiga está directamente relacionada con la
disponibilidad de tejido del donante. La disponibilidad limitada de
tejido de la vejiga prohíbe la reconstrucción de rutina frecuente de
la vejiga con tejido de la vejiga normal. El tejido de la vejiga que
está disponible y se puede considerar útil incluir imperfecciones
inherentes y la enfermedad. Por ejemplo, en un paciente que sufre de
cáncer de vejiga, el tejido de la vejiga restantes pueden estar
contaminados con metástasis. El paciente es, pues, predestinados a
menos de perfecto funcionamiento de la vejiga.
Como resultado, otros han tratado de una célula de cultivo de enfoque
(Atala et al.) Donde las células del músculo liso y las células de
urotelio se aíslan de una biopsia, por separado en el cultivo in
vitro, y luego agregó en un sustrato de la vejiga. Sin embargo, este
proceso es largo y lleva mucho tiempo en que un paciente tiene que
esperar por lo menos ocho semanas antes de la próxima implantación de
un andamio de la ingeniería tisular. Otros tejidos también han sido
evaluados como una fuente de células para el aumento de la vejiga para
el tejido bucal, por ejemplo. Ver El-Sherbiny et al., "Tratamiento de
los defectos de la uretra: la piel, mucosa bucal o de la vejiga, tubo
o parche? Un estudio experimental en perros," 167 J. Urol. 2225-2228
Los métodos de la presente invención proporcionar una matriz de
polímeros biocompatible, sintético o natural que se forma para
adaptarse a su uso como una parte o la totalidad de la estructura de
la vejiga para ser reparado, reconstruido, ampliado o sustituido. Un
material biocompatible es cualquier sustancia tóxica o que no tengan
efectos perjudiciales sobre la función biológica. Como se usa aquí el
término "polímero sintético" se refiere a los polímeros que no se
encuentran en la naturaleza, incluso si los polímeros se hacen de
forma natural los biomateriales. El término "polímero natural" se
refiere a los polímeros que son de origen natural. La forma de matriz
polimérica, sintético o natural es preferentemente poroso para
permitir el depósito de células y la migración, tanto dentro como en
los poros de la matriz. Puede ser hecho de diversos materiales de
soporte, como por las espumas liofilizado, los andamios no tejidos, o
fusión-soplado los andamios.
liofilización o el secado por congelación, se elimina un disolvente de
un polímero de solución de disolvente a través de la sublimación,
dejando tras de sí un sólido poroso. Más específicamente, el proceso
de separa un disolvente de una solución a través de un sólido
congelado a la transición de fase gaseosa. Esta transición, llamado
sublimación, elimina el disolvente sin que nunca entrar en un estado
líquido. La final es construir una sólida estructura porosa hecha de
los restantes soluto a menudo descrito como una espuma.
Solución líquida de polímero compuesto natural o sintético
biocompatible, biodegradable, o cualquier mezcla de polímeros tales,
disuelto en un disolvente que puede ser removido a través de la
sublimación, es vertido en un abierto, con bisagras molde y girar
mecánicamente durante la congelación. En el primer paso, el molde es
de bisagra y cierre parcialmente lleno con la solución. Durante el
llenado, algunos de volumen del molde permanece vacío. Después de la
liofilización, el volumen de la solución vertida en el molde hará que
el volumen andamio mientras que el volumen vacío hará que el vacío
hueco. Después del llenado, el molde se puede girar en un número de
maneras. Cuando el molde está en posición vertical y se dio
rápidamente, actúa una fuerza centrífuga en la solución líquida,
empujándolo de distancia del centro del molde y hasta a sus lados. El
molde se puede girar a continuación, se enfría lentamente o flash
congelado por inmersión en nitrógeno líquido. El molde también puede
ser en posición horizontal y se gira
lentamente por el cual la gravedad permite que el polímero para
establecerse en uno de los lados del molde. Suponiendo que la
temperatura del molde es inferior a la temperatura del aire ambiente,
una capa de líquido congelado poco a poco se acumulan en el interior
del molde, resultando en una piel congelada interior. Ambos métodos
producen un congelados construcción que tiene una forma y textura
consistente con la geometría interna del molde. Una vez completamente
congelado, la construcción se coloca en un vacío para la sublimación.
[Melt-soplado tecnología es capaz de incorporar los biopolímeros
sintéticas, como el de la PGA, PLA o sus copolímeros respectivos, y
los polímeros naturales. Un andamio construido con tanto material es
biocompatible y reabsorbible, pero puede no ser lo suficientemente
porosa para facilitar la proliferación óptima de las células o
crecimiento de tejido avanzadas. Para superar este obstáculo, una
porogen puede añadirse durante la fabricación de la tela no tejida.
Porogens como la sal o glucosa esferas pueden sacar el polvo o soplado
en las fibras fundido durante su proceso de extrusión. Microesferas
de gelatina también se puede utilizar. El andamio porosidad
resultante puede ser controlada por la cantidad de porogen añadido,
mientras que el tamaño de los poros depende del tamaño de las esferas.
Como estas partículas entran en el aire turbulento, son incorporados
al azar en la web. Debido a que los filamentos en la masa estructura
de soplado normalmente se contraerá debido a la cristalización a
medida que envejecen, la estructura porosa puede someterse a un
proceso de recocido con el material porogen en su lugar. Una vez que
el porogen compuesto de fibra es recocido, la construcción entera
entonces puede ser sumergidos en agua para que el porogens disolución
o lixiviación de la web. La matriz resultante contiene fibras de
polímeros, pero con mayor distancia entre ellos para porosidades
efecto. En una realización, la matriz tiene más porogen y, por tanto,
más la porosidad, la porosidad superior al 90%.
Los polímeros o mezclas de polímeros que se utilizan para formar el
biocompatibles, andamios biodegradables también puede contener
composiciones farmacéuticas. El polímero se ha descrito anteriormente
pueden ser mezclados con uno o más medicamentos antes de formar el
cadalso. Alternativamente, tales composiciones farmacéuticas que
puede cubrir la horca después de que se formó. La variedad de
los productos farmacéuticos que pueden ser utilizados en relación con
los andamios de la presente invención incluye los conocidos en el
arte. En general, los productos farmacéuticos y / o productos
biológicos que pueden ser administrados a través de las composiciones
de la invención incluyen, sin limitación: antiinfecciosos, tales como
antibióticos y agentes antivirales, agentes quimioterapéuticos,
agentes anti-rechazo, analgésicos y combinaciones de analgésicos,
antiinflamatorios , hormonas como los esteroides, los factores de
crecimiento, y otros derivados naturales o de ingeniería genética
(recombinante), proteínas, polisacáridos, glicoproteínas, o
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Avastin - Wet Macular Degeneration

Avastin es el nombre de marca para Bevaciumab un anticuerpo monoclonal
o un anticuerpo que es una copia idéntica de una célula madre soltera.
Fue aprobado en 2004 por la FDA para su uso en el tratamiento de
algunos tipos de cáncer y se utiliza como tratamiento de primera o
segunda para los pacientes.
En el primer inhibidor de la angiogénesis clínica disponible de los
Estados Unidos que inhibe las células del cáncer mediante el bloqueo
de nuevo el crecimiento de vasos sanguíneos en los tumores
pre-existentes. Sólida, no líquida, el tumor necesita para crecer los
vasos sanguíneos adicionales para poder llegar a un tamaño determinado
Con un agente Angiostáticas como Avastin el crecimiento de nuevos
vasos sanguíneos es más lento detener el crecimiento del cáncer de
forma indefinida. Generalmente, se administra cada 14 días por vía
intravenosa en el brazo y se puede utilizar con otras drogas en
combinación y con la inyección intravenosa de 5-fluorouracilo
quimioterapia basada en.
Desarrollado por Genentech (NYSE: DNA), una empresa líder en
biotecnología, se comercializa en los Estados Unidos bajo el nombre de
Genentech y fuera de los EE.UU. en virtud de Roche.
Cuando estaba disponible originalmente en el 2004 sólo fue aprobado
por la FDA para el tratamiento de muchas formas de cáncer de células
pequeñas de pulmón y cáncer de colon metastásico. Un cáncer
metastásico, cáncer de colon en este caso, es un cáncer que se
extiende de una parte u órgano a otra parte no adyacentes o de
En 2008, la FDA abrió las puertas y permitió que para el tratamiento
del cáncer de mama. También hay ensayos clínicos en curso para el uso
de Avastin para el tratamiento de cáncer de colon metastásico,
carcinoma de células renales, cáncer de mama metastásico, el
glioblastoma multiforme metastásico, hormona de cáncer de próstata
metastásico refractario, metastásico o irresecable cáncer de páncreas
localmente avanzado, metastásico y cáncer de ovario.
Avastin también está siendo utilizado actualmente fuera de la
etiqueta, la práctica de la prescripción de medicamentos para un
propósito ajeno al ámbito de aplicación de la etiqueta de aprobación
del fármaco para el tratamiento de la degeneración macular húmeda por
algunos especialistas de la retina.
La degeneración macular húmeda o AMD es una condición que causa la
pérdida de la visión del crecimiento de la choriocapillaries anormal
de los vasos sanguíneos, a través de la membrana de Bruch. Esto
conduce finalmente a la sangre y las proteínas fugas por debajo de la
mácula, una mancha oval cerca de la mitad de la retina en el ojo
humano. Con AMD rápido, a menudo la pérdida irreversible de la visión
puede ocurrir a través de la filtración, el sangrado y cicatrización
de los vasos sanguíneos si no se trata .
El doctor Philip J. Rosenfeld, MD, PhD del Bascom Palmer Eye
Institute llevó a cabo un estudio que mostró resultados positivos para
el tratamiento de la DMAE con Avastin. Según el estudio, el Dr.
Rosenfeld Avastin mejora la visión en tan sólo una semana para los
pacientes tratados por AMD.
AMD para el tratamiento con Avastin se usa en cantidades muy bajas
por los especialistas de retina. Por lo general, los farmacéuticos
tienen una transferencia de la droga del vil original a un pre-lleno
de agujas que contienen dosis únicas. Los especialistas de entonces
suelen tratar al paciente en su propia oficina.
Como con cualquier droga siempre es mejor hablar con su médico o
farmacéutico antes de comenzar cualquier tratamiento.
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Una vez CZ-1 preservar solución para el trasplante de órganos: estudio comparativo con la solución de preservación de la UW

Antecedentes La Universidad de Wisconsin, basado en la preservación
solución coloidal (solución UW) es la solución más eficaz para
preservar el trasplante multiorgánico. Desafortunadamente, la falta
de disponibilidad de soluciones de preservación de órgano retraso
impedido la progresión de los trasplantes de órganos en China
cardenal. En este estudio, hemos validado un órgano preservar
Changzheng de órganos Preservación de la solución (CZ-1 solución) y lo
comparó con la solución de UW.
Métodos de una serie de estudios se realizaron sobre cómo y cuánto
tiempo CZ-1 solución podría preservar los riñones, hígados, corazones,
pulmones y el páncreas de los conejos de Nueva Zelanda y las ratas SD.
Morfología de los órganos trasplantados se ha estudiado mediante
microscopía visible y microscopía electrónica; funciones bioquímicas y
fisiológicas y la tasa de supervivencia de los órganos durante el
almacenamiento prolongado en frío fueron estudiados.
Resultados No hubo diferencias significativas entre CZ-1 y las
soluciones de UW en la preservación de los riñones, el hígado, el
corazón o los pulmones de los conejos, los riñones, el hígado, mucosa
intestinal o de páncreas de ratas SD o testículos cinco donantes
fallecidos. En algunos aspectos, como la preservación de los
corazones de los conejos, la mucosa intestinal de las ratas y
páncreas, el efecto de la CZ-1 solución fue superior a la solución de
UW. CZ-1 podría preservar con seguridad durante 72 horas los riñones,
el hígado durante 24 horas, los corazones durante 18 horas y los
pulmones durante 8 horas para las ratas SD. Doce riñones preservados
en frío CZ-1 solución para 22-31 horas fueron trasplantados con éxito
y la media de tiempo de recuperación de la función renal era (3,83 ±
1,68) días.
Conclusiones CZ-1 solución es tan eficaz como la solución de UW para
la conservación de órganos. El desarrollo de la CZ-1 solución no sólo
reduce costos y mejora la conservación de órganos, sino que también
promueve el desarrollo futuro de los trasplantes de órganos en China.
CZ-1 solución contiene por litro de ácido lactobionato 100 mmol, KH 2
PO 4 25 mmol, MgSO 4 5 mmol, adenosina 5 mmol, el glutatión 3 mmol,
dexametasona 8 mg, 1 mmol alopurinol, NaOH 0,1 mmol, 60 mmol de
sacarosa, dextrano - 40 50 g, verapamilo de 20 mg (pH de 7,45 ± 0,10)
y la presión osmótica (310 ± 10) mOsm / L. Solución de UW estuvo
presente desde el Centro de Trasplante de Órganos de la Universidad
del Estado de Wisconsin, EE.UU..
HC-Una solución: una solución de Ross vez desarrollado por Changzheng
Hospital y Centro de Sangre de Shanghai en la estación de 1982. 7
Eur solución Collins (solución CE): glucosa 194 mmol, KH 2 PO 4 15
mmol, K 2 HPO 4 42 mmol, NaHCO 3 10 mmol, KCl 15 mmol, 355 mOsm / l.
Healthy Nueva Zelanda conejos machos 2.0-2.5 kg de peso y ratas macho
SD 200-300 g de peso fueron proporcionados por el Instituto de
Investigación de la Segunda Universidad Médica Militar (Shanghai,
Dieciocho riñones de conejo se dividieron en 3 grupos y se lava con
el CZ-1 solución a 2 ° C - 4 ° C, con solución de UW y HC-Una solución
a 0 ° C - 4 ° C, respectivamente, 0, 24, 36, 48, 60, 64, 72 y 80
horas. Los cambios morfológicos fueron observados por microscopía
electrónica y visible. La tasa de respiración mitocondrial renal de
control, el riñón Na +-K +-ATPasa, la corteza renal condrioma Ca 2 +,
se midió contenido de la corteza renal de glutatión y el contenido de
la ATP. Los riñones de rata fueron almacenadas en frío CZ-1 solución
y la solución de UW durante 48 horas y 72 horas. Después del
trasplante, se observó la recuperación de la función renal.
Doce hígados de conejo se dividieron en 2 grupos y lava con el CZ-1 y
la solución de UW, respectivamente, a 0 ° C - 4 ° C durante 0, 8, 12,
18, 24 y 48 horas. Los cambios morfológicos fueron observados por
microscopía electrónica y visible.
Treinta y seis hombres hígados de rata SD se dividieron en 2 grupos.
Los hígados de control han sido incorporadas al circuito de perfusión
aislada de inmediato. Que fueron recogidos después de almacenamiento
en frío. El medio de reperfusión fue solución de Krebs-bicarbonato de
Henseleit (600 ml que contiene NaCl 118 mmol / L, KCl 4,7 mmol / L, KH
2 PO 4 1,2 mmol / L y HEPES 20 mmol / L). Un oxigenador de membrana
(Sci Med, EE.UU.) purgado con O 2: CO 2 (95%: 5%) se utilizó para
mantener el pH de 7,4 ± 0,05 y PO 2> 450 mmHg. El perfundido se
recircula y se mantiene a 37 º C. Después de ser eliminados con UW
frío o CZ-1 para 18, 24 o 30 horas, el contenido de la ATP fue
probado; sinusoidal de mortalidad de las células del revestimiento
interior (SLCM), Krebs-Henseleit perfundido relación de
amortiguamiento los cuerpos cetónicos (pkbr) y el contenido de agua
del tejido hepático (HTWC) fueron medidos.
La eficacia de la solución CZ-1 fue evaluada por la restauración del
hígado trasplantado a un funcionamiento normal dentro de 24 horas
después de almacenamiento a baja temperatura.
Doce corazones de conejo se dividieron en 2 grupos y lava con CZ-1 o
la UW a 0 ° C - 4 ° C durante 0, 18, 24, 36 y 48 horas. Cambios en la
morfología fueron observados por microscopía electrónica y visible.
Los corazones de conejo se han conservado en frío de 0, 6, 12 y 18
horas y el tejido de miocardio y el contenido de ATP mitocondrial
miocardio Ca 2 + índices bioquímicos se evaluaron.
Los corazones de ratas SD fueron preservadas en frío CZ-1 solución
durante 18 horas y 24 horas y las tasas de supervivencia después del
trasplante alogénico se registraron.
Los pulmones de conejo se dividieron en 2 grupos y se conserva en
CZ-1 o la UW a 4 ° C - 10 ° C durante 0, 8,12, 24, 36 y 48 horas.
Cambios en la morfología se observaron.
Los pulmones de ratas SD utilizarse para trasplantes canulación
triple 8 fueron preservados en CZ-1 y Euro-Collins y la solución
entonces su presión arterial parcial de oxígeno en la sangre, se
compararon arterial de dióxido de carbono de la presión arterial
parcial y húmeda / / peso seco.
Dieciocho SD intestino delgado de ratas fueron divididas en 3 grupos,
enjuagarse con CZ-1, UW o 50 ml HC-A, conserva a 2 ° C - 4 ° C durante
0, 10, 18 y 24 horas después del blanqueo y luego observar visible y
microscopía electrónica de la morfología de la mucosa intestinal y el
metabolismo de estudio de la energía bioquímica.
El páncreas tejidos de ratas SD se dividieron en 2 grupos, enrojecida
o con UW CZ-1 a 2 ° C-4 ° C, conservado a 0 ° C-4 ° C durante 0, 24,
48 y 72 horas, y la prueba de 6 PG-ceto-1a y TXB 2.
Los testículos de los cinco donantes fallecidos (de 24 a 30 años)
fueron rápidamente disecada, inmerso en CZ-1 solución a 2 ° C-4 ° C y
luego conservados a 0 ° C-4 ° C durante 1 hora. Luego, se lava con el
50-100 CZ-1 ml de solución a través de la arteria espermática,
conservado en CZ-1 solución a 0 ° C-4 ° C durante 12, 24, 36, 48 y 60
horas y luego se observa manchada por el Excmo chromatins .
Los comités de ética de los tres hospitales aprobado el protocolo de
estudio experimental de la aplicación clínica. Todos los pacientes
dieron firmado acuerdos de consentimiento informado médico.
Doce de riñones procedentes de donantes fallecidos, 6 (todos los
hombres, de entre 22 a 29 años) estaban encendidas en el CZ-1
solución, preservado para 24-31 horas, y luego trasplantados a los
pacientes. Después de la operación, se observó la recuperación de los
pacientes la función renal. Los tipos de sangre de los donantes
fueron los siguientes: O en 3 donantes, una de 2 y B en 1. El tiempo
de isquemia caliente de los riñones de los donantes fue de 9 minutos y
8 segundos a 12 minutos y 35 segundos, el tiempo de isquemia caliente
fue de 1 hora y 21 minutos a 2 horas y 15 minutos, el tiempo de
isquemia fría fue de 22 horas y 18 minutos a 29 horas y 3 minutos y el
tiempo de isquemia total fue de 23 horas y 56 minutos a 30 horas y 51
minutos. Los 12 donatarios (7 hombres y 5 mujeres, de entre 33 a 59
años, media 41 años) sufría de uremia crónica nefrítico y ha sido
objeto de 10 a 58 cursos de hemodiálisis antes de la operación. De
compatibilidad de sangre fue: O: O en 6 casos, A: en 3 casos, B: B en
2 casos y A: AB en un caso.
El análisis estadístico
Todos los datos fueron expresados media ± desviación estándar (SD) y
analizados por la prueba de la t. Todos los análisis estadísticos se
realizaron con el programa SPSS 10.0. Valor de p <0,05 fue considerado
estadísticamente significativo.
Estudio morfológico
Microscopía electrónica y visible mostró que no había ninguna
diferencia significativa en la morfología entre el tejido renal
conservada en CZ-1 para la solución de menos de 72 horas de
almacenamiento en frío y que conserva en la solución de UW. La
degeneración de las células de los tejidos y orgánulos de los riñones
preservados en solución CZ-1 fue más suave que los que se conservan en
la solución de UW.
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VEGF Trap-Eye Fase 2 Wet Resultados de AMD registró en ARVO anual, de la reunión

Descripción :
El espesor y volumen macular en todo el período de 6 semanas de
observación. El VEGF Trap-Eye fue generalmente bien tolerada, y no
hubo relacionados con las drogas acontecimientos adversos graves. Los
eventos adversos fueron en su mayoría relacionados con el
procedimiento de inyección.
VEGF Trap-Eye
Factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF) es una proteína
natural del cuerpo, cuya función normal es desencadenar la formación
de nuevos vasos sanguíneos (angiogénesis) para apoyar el crecimiento
de los tejidos del cuerpo y órganos. También se ha asociado con el
crecimiento anormal y la fragilidad de nuevos vasos sanguíneos en el
ojo, que conducen al desarrollo de la DMAE húmeda. El VEGF Trap-Eye
es plenamente humana, soluble VEGF receptor de la proteína de fusión
que une a todas las formas del VEGF-A, junto con la relacionada con el
factor de crecimiento placentario (PlGF). El VEGF Trap-Eye es una
específica y muy potente bloqueador de estos factores de crecimiento.
El bloqueo de VEGF, que puede prevenir la formación anormal de los
vasos sanguíneos y filtración vascular, ha demostrado ser beneficioso
en el tratamiento de la DMAE húmeda. El bloqueo de VEGF ha demostrado
ser eficaz en pacientes con DMAE húmeda, y un inhibidor de VEGF,
ranibizumab, ha sido aprobado para el tratamiento de pacientes con
esta condición.
La degeneración macular senil (DMS) es una causa principal de ceguera
adquirida. Los pacientes con esta condición pueden experimentar una
pérdida de visión debido al desarrollo anormal de los vasos sanguíneos
frágiles en la parte posterior del ojo. Un tipo particular de AMD,
llamada AMD húmeda, representa aproximadamente el 90% de la ceguera
causada por AMD. DMAE húmeda es la causa principal de ceguera en las
personas mayores de 65 años de edad en los EE.UU. y Europa.
La degeneración macular se diagnostica como bien seco (no exudativa)
y húmeda (exudativa). En la DMAE húmeda, crecen nuevos vasos
sanguíneos debajo de la retina y la pérdida de sangre y de fluidos.
Esta fuga provoca la interrupción y la disfunción de la retina,
creando puntos ciegos en la visión central, y se puede dar cuenta de
la ceguera en los pacientes con DMAE húmeda.

Tecnología para la cirugía de mínimo acceso

Uno de los cambios importantes en la práctica médica en los dos
últimos decenios ha sido la reducción de la lesión traumática
inherente a las intervenciones quirúrgicas. Los nuevos enfoques de
intervención quirúrgica y son generalmente denominadas mínimamente
invasivas. Sin embargo, esta terminología es inadecuada por dos
razones. En primer lugar, tiene connotaciones de una mayor seguridad,
que no es el caso. En segundo lugar, es semánticamente incorrecta, ya
que la invasión es absoluta, y de hecho este tipo de intervenciones
son tan invasivas como la cirugía abierta en términos de alcance de
los diversos órganos y tejidos. El sello distintivo de los nuevos
enfoques es la reducción en el trauma de acceso. Por lo tanto, un
término genérico más adecuado es la terapia de mínimo acceso.

Terapia de mínimo acceso:
La terapia de acceso mínimo comprende varios enfoques, implica varias
disciplinas, y los recortes a través de las diversas especialidades
dentro de estas disciplinas. En esencia, sin embargo, tiene tres
armas: la cirugía de mínimo acceso, la endoscopia flexible de
intervención, y la radiología intervencionista percutánea. Estas
aproximaciones terapéuticas son muy complementarias, y cada vez se
utilizan conjuntamente para tratar los casos individuales. El
advenimiento de la terapia de mínimo acceso ha hecho hincapié en la
necesidad de reagrupar los especialistas de diferentes disciplinas
existentes para formar grupos de enfermedades relacionadas con el
tratamiento multidisciplinario, por ejemplo, los grupos de productos
gastrointestinales, cardiovasculares o del aparato locomotor. Grupos
de estas características facilitaría el progreso real y la eficiencia
en la gestión y el tratamiento de muchas enfermedades.
La terapia de acceso mínimo pretende reducir al mínimo la agresión
traumática para el paciente sin comprometer la seguridad y la eficacia
del tratamiento en comparación con la cirugía abierta tradicional. Si
esto se consigue, los pacientes se recuperan más rápidamente, lo que
reduce la estancia hospitalaria y permite volver más rápido a la
actividad completa y el trabajo. Los tres tipos de terapia de mínimo
acceso se basan en sistemas de visualización de la imagen y la
tecnología, además de la habilidad del operador. Así, los cirujanos
endoscópico, los endoscopistas intervencionistas flexible, y
radiólogos intervencionistas todo el trabajo de las imágenes mostradas
del campo operatorio en lugar de la realidad. Tres consideraciones se
derivan de esta. En primer lugar, estas técnicas son dependientes de
la tecnología en que el procedimiento no puede realizarse si el
sistema de imagen no. En segundo lugar, la imagen es bidimensional, y
por lo tanto el operador tiene que procesar la imagen y las claves de
profundidad monocular mental para identificar las estructuras de
destino y realizar manipulaciones precisas. En tercer lugar, y esto
se aplica particularmente a la cirugía de mínimo acceso, el visual y
el eje del motor del operador ya no están alineados, y con la actual
pantalla del monitor de televisión, la imagen está muy alejada de la
zona operatoria real. Así, el cirujano se enfrenta con un problema de
asignación y no puede mirar a sus manos durante la manipulación.
Estas restricciones se pueden superar con la formación, pero, no
obstante, requieren ciertos atributos innatos.

Sistemas de imagen

Las fuentes de luz y cables de:
Dos tipos de fuente de luz están en uso: de xenón y halogenuros
metálicos (halógenos). Xenon tiene un efecto más natural (blanca) del
espectro de color y un tamaño de punto más pequeño que el de haluro.
En la práctica, la luz amarilla de la lámpara halógena se compensa en
el sistema de cámaras de vídeo por el balance de blancos. La salida
de las fuentes de luz es conducida al telescopio por los cables de luz
que contienen paquetes de fibra de vidrio o de líquido especial. Los
cables de fibra de vidrio de luz son más utilizados debido a su
flexibilidad, aunque son menos eficientes que los tipos de líquidos
debido a la falta de coincidencia de fibra en las uniones.
En la actualidad, la mayoría de los telescopios utilizados en la
cirugía de mínimo acceso son del tipo de visualización rígido basado
en la barra de Hopkins-sistema de lentes. Estos telescopios varían en
diámetro y en su dirección de vista. En la laparoscopía, los
telescopios de 10 mm con cero (ver adelante) o 30 ° y 45 ° direcciones
hacia adelante oblicuo (ángulos de visión) son los más comúnmente
utilizados. Para el mismo diámetro, el telescopio viendo hacia
adelante transmite más luz que los tipos oblicua y es más fácil de
usar ya que el campo visual es constante, independientemente del eje
de rotación en que se celebra el telescopio. Sin embargo, el
telescopio de 30 ° tiene ventajas considerables que superan estas
limitaciones. Permite al cirujano a mirar hacia abajo en el campo
quirúrgico para la disección y se puede girar para ver el objeto desde
todos los lados. La barra de Hopkins sistema de objetivo puede ser
sustituido por el índice de gradiente de varillas de vidrio especial
único de telescopios rígidos muy estrechos y cortos, aunque todavía
hay problemas de producción con este sistema. 3
Telescopios de fibra óptica son la base del diagnóstico y terapéutica
endoscopia flexible de intervención. En esencia, el endoscopio
flexible se compone de dos haces de fibra óptica: una para la
transmisión de la luz y uno para transmitir la imagen al ocular.
Telescopios de fibra óptica tienen peor resolución que los rígidos y
por lo general producen una imagen más pequeña. Sin embargo, son
orientables. La principal ventaja de la fibra de vidrio óptico es su
capacidad para transmitir la luz a grandes distancias por el total de
las reflexiones internas con pérdidas insignificantes. Los haces de
luz se hacen de múltiples fibras de vidrio 25 micras, que no están
alineados, es decir, el haz de luz no es coherente. Por el contrario,
las fibras en el paquete de la imagen tiene que ser alineados de un
extremo del paquete a la otra. La lente del objetivo en el extremo
distal del endoscopio se utiliza para enfocar la imagen en el paquete
de la imagen. Como cada fibra de vidrio de imágenes (6-10 micras),
admite sólo la luz alineada con su eje, que transmite sólo una pequeña
fracción de la imagen, llamada un elemento de la imagen o pixel. La
resolución de un endoscopio es directamente proporcional a la cantidad
de fibras embaladas en el paquete de la imagen (normalmente 2.5-10 ×
10 3).
Telescopios optoelectrónicos y endoscopios tienen un dispositivo de
transferencia de carga incorporada en el plano de la imagen de la
lente objetivo en el extremo distal del telescopio (en la tecnología
de chip de palo). El sistema tiene menos de interfaces en las que la
calidad de imagen puede ser degradado y la mayor sensibilidad de luz
que el telescopio rígido de montaje de la cámara.

Las células de Kupffer y sus mediadores

De activación de los macrófagos postraumático aumenta el desarrollo de
la inflamación sistémica / inmunosupresión y disfunción orgánica.
Nuestra hipótesis es que las células de Kupffer son la principal
fuente de proteína quimiotáctica de monocitos-1 (MCP-1) la producción
de la hemorragia después de un trauma, que la administración de
estradiol-17-estradiol (E2) después de un traumatismo hemorragia
modula la liberación de MCP-1 y reduce el daño de órganos a distancia,
y que los efectos saludables de E2 son mediados a través del receptor
de estrógeno (ER) -.

Para probar estas hipótesis, los ratones hembra B57BL/J6 recibido E2
(50 μg/25 g) o de un vehículo después de un traumatismo, hemorragia y
mujeres 129 Sve ER-ß-/ - ratones transgénicos y ovariectomizadas
ratones de tipo salvaje recibido E2, o ER-agonista de propilo triol
pirazol (50 μg/25 g) después de un trauma hemorragia. MCP-1 sistémica
y la interleucina-6 y su liberación por el hígado, el bazo y los
macrófagos pulmonares se determinaron por citometría de flujo de 4
horas después del trauma hemorragia. Antes de la depleción de células
de Kupffer con cloruro de gadolinio disminuyó significativamente
sistémica MCP-1 y la interleucina-6 después de un traumatismo de
hemorragia y se asocia con disminución del edema / infiltración de
neutrófilos en el pulmón y el hígado. Las células de Kupffer eran los
macrófagos sólo muestra los importantes MCP-1 de liberación, que se
redujo notablemente por el E2, o triol pirazol propilo en tipo salvaje
y en ER-ß-/ - ratones. El tratamiento previo de los ratones con
anticuerpos anti-MCP-1 antisuero impedido un aumento de la
mieloperoxidasa y edema en los pulmones y el hígado. Estos hallazgos
sugieren que las células de Kupffer derivados de MCP-1 juega un papel
importante en la disfunción de órganos a distancia después de un
trauma-la hemorragia.
La muerte después de un trauma múltiple se produce de forma inmediata
en la escena de un accidente o dentro de los horarios del evento.
Estas muertes se debe principalmente a la gravedad de las lesiones o
complicaciones directas de la lesión primaria (por ejemplo, la
hemorragia masiva o grave lesión cerebral traumática). Los pacientes
que sobreviven de la lesión inicial pueden desarrollar complicaciones
en los sistemas de órganos diferentes, no necesariamente afectada por
el trauma principal, en cuestión de días o incluso semanas después del
trauma. En este grupo, la mayoría de los pacientes mueren a causa de
infecciones graves y la disfunción múltiple de órganos syndrome.1
Los macrófagos juegan un papel importante en la regulación de la
respuesta inmune después de un traumatismo, shock y sepsis.2-6
estimulación de los macrófagos es reconocida como una reacción
fisiológica del organismo para restablecer la homeostasis. Sin
embargo, la activación excesiva y prolongada de los macrófagos, en
combinación con otros leucocitos y las células endoteliales, también
contribuye significativamente al desarrollo del síndrome de respuesta
inflamatoria sistémica y la inmunosupresión postraumático, que en
última instancia, puede resultar en disfunción orgánica múltiple
syndrome.7-9 Estos cambios desadaptativos en función de las células se
ha demostrado que puede prevenir por los esteroides sexuales (por
ejemplo, 17ß-estradiol), que están implicados en la regulación de los
mediadores de la inflamación de macrófagos production.10, 11 de
Las células de Kupffer representan por mucho la mayor población de
macrófagos tisulares, que comprende 80 a 90% de las tiendas de
tejidos. Las células de Kupffer desempeñar un papel clave en la
respuesta inmune a varios niveles bajos de flujo de conditions9, 12,13
a través de la secreción de mediadores inflamatorios que tienen
importantes efectos sistémicos. La citocina proinflamatoria
interleucina-6 (IL-6), por ejemplo, que se ha demostrado para
participar significativamente en la cascada de eventos que conducen a
la lesión de órganos a distancia y el aumento de la susceptibilidad
del huésped a la sepsis post-traumático, se demostró que era
principalmente producida por las células de Kupffer después de un
traumatismo -hemorrhage.9, 14
Proteína quimiotáctica de monocitos 1 (MCP-1) también es liberado por
activa Kupffer cells.15 MCP-1, un miembro de la familia de las
quimiocinas CC, desempeña un papel importante en la respuesta
inflamatoria por mediación de migración dirigida de los monocitos y
macrófagos in vivo en varios modelos inflamatorios (ligadura cecal y
punción, peritonitis, isquemia / reperfusión) .15-18 Además de la
contratación de estas células, MCP-1 también puede activar los
macrófagos y endoteliales cells.17 ,19-21 Estudios recientes también
han proporcionado pruebas de que MCP -1 participa significativamente
en la atracción de neutrófilos y la generación de neutrófilos del
tejido depende damage.16, 20 Además de las células de Kupffer, varios
otros tipos de células (linfocitos, células del músculo liso,
plaquetas) son capaces de producir MCP-1.16, 17, 19,20,22 macrófagos
de otros órganos (por ejemplo, los pulmones y el bazo) son importantes
fuentes potenciales de esta quimioquina. Por ejemplo, los macrófagos
alveolares demostrado un incremento significativo de MCP-1 después de
una expresión de ARNm insult.23 infecciosas
Información sobre las funciones de los macrófagos, y en particular la
pronta liberación de mediadores como la MCP-1, debe permitir la
intervención inmunomoduladores encaminadas a mejorar la fase de
hiperinflamatoria, que puede conducir a la prevención del daño de
órganos a distancia y la mortalidad después de un traumatismo. Por lo
tanto, examinar si las células de Kupffer son la principal fuente de
MCP-1 sistémica después de un traumatismo y la hemorragia si la caída
de MCP-1 de liberación contribuye a una reducción de daño de órganos a
distancia. Nuestra hipótesis es que las células de Kupffer son la
principal fuente de producción de MCP-1 después de un traumatismo y la
hemorragia que la modulación de MCP-1 por la liberación E2, o el
receptor de estrógeno (ER) - agonista triol pirazol propilo (PPT)
reducirá el daño de órganos a distancia. Para este estudio, los
animales fueron tratados con cloruro de gadolinio (GdCl3), que se sabe
que extirpar las células de Kupffer, 9,14 y el efecto de la depleción
de células de Kupffer se examinó en sistémica MCP-1, así como en el
hígado y el daño tisular pulmonar después de la trauma hemorragia. En
estudios adicionales, el efecto de 17ß-estradiol (E2) sobre estos
parámetros y MCP-1 capacidad de liberación de los macrófagos tisulares
diferentes (hígado, pulmón, bazo), fue determinado.
Animales y grupos experimentales
Todos los estudios realizados en animales se realizaron en conformidad
con las directrices de los Institutos Nacionales de Salud y fueron
aprobadas por el cuidado animal y Uso Comité Institucional de la
Universidad de Alabama en Birmingham. Ratones de B57BL/J6 Hombre (no
proestro), de 8 a 12 semanas de edad y un peso de 19 a 23 g, fueron
obtenidos de los Laboratorios Charles River (Wilmington, MA). Estos
animales fueron tratados con GdCl3 o 17ß-estradiol (E2). Además,
ER-ß-mujer / - ratones transgénicos (129 SVE) y el correspondiente
tipo salvaje (WT) animales (12 meses, 28 a 32 g de peso corporal)
fueron incluidos en este estudio para determinar si ER-desempeña un
papel en la la regulación de la función inmune. Estos animales fueron
ovariectomizadas en 6 semanas de edad. El ER-ß ratones KO fueron
amablemente proporcionados por la Dra. Heather Harris y los Recursos
Biológicos de Wyeth Research. Estos animales recibieron E2, o la
ER-PPT agonista de la hemorragia después de un traumatismo.
Cloruro de gadolinio (GdCl3)
Cuarenta y ocho horas antes de trauma hemorragia u operación simulada,
un grupo de ratones recibieron una inyección intravenosa de GdCl3 en
la vena de la cola (10 mg / kg de peso corporal) para extirpar las
células de Kupffer. Los controles recibieron una inyección intravenosa
de vehículo (suero salino al 0,9%), al mismo tiempo point.9, 24,25
17-ß estradiol y ER-agonistas PPT
La administración subcutánea del vehículo (dimetilsulfóxido) se
realizó después de la finalización de la operación simulada. En los
traumatismos grupos de hemorragia, E2 (50 μg/25 g), PPT (50 μg/25 g),
o vehículo (dimetilsulfóxido) se inyecta por vía subcutánea
inmediatamente antes del inicio de la reanimación con líquidos.
Trauma-Hemorragia Procedimiento
Ratones en el trauma de los grupos de hemorragia fueron anestesiados
con isoflurano (Minrad, Bethlehem, PA) y contenida en un position.26
una laparotomía media en posición supina, se realizó, que fue cerrada
en dos capas con suturas (Ethilon 6 / 0; Ethicon, Somerville, NJ).
Ambas arterias femoral y la vena femoral derecha se canula con tubos
de polietileno (Becton-Dickinson, Sparks, MD). La presión arterial se
midió a través de una de las líneas arterial con un analizador de la
presión arterial (Micro-Med, Louisville, KY). A los 10 minutos después
de despertarse, los animales fueron sangrados a través del catéter
arterial otros un medio de presión arterial de 35,0 ± 5,0 mm Hg, que
se mantuvo durante 90 minutos. Al final del procedimiento, los
animales fueron reanimados a través de la vía venosa con un volumen
cuatro veces la sangre derramada utilizar el lactato de Ringer.
Después de retirar los catéteres, se cerraron las incisiones.
Sham-operados los animales sometidos a los mismos procedimientos
quirúrgicos, pero no eran ni una hemorragia ni resucitado.
Procedimientos de cosecha
Los animales fueron anestesiados con isoflurano de nuevo y se
sacrificaron 4 horas después de la operación simulada o la realización
de la reanimación en el trauma de los grupos de la hemorragia. La
sangre fue obtenida a través de punción cardíaca usando una jeringa
recubierta con ácido etilendiaminotetraacético (Sigma, St. Louis, MO).
La sangre se centrifuga (10.000 rpm, 10 minutos, 4 ° C) y el plasma
almacenado a -80 ° C hasta que un análisis más profundo. Por otra
parte, pulmón, bazo y el hígado fueron eliminados de forma aséptica.
Determinación de húmedo a seco Ratios de
Húmedo a seco de relaciones de pulmón (pulmón izquierdo) e hígado
(lóbulo derecho) fueron utilizados como medida de tejido edema.27
muestras de tejido fueron pesadas inmediatamente después de la
eliminación (peso húmedo) y luego sometidos a la desecación en estufa
a 95 ° C (Blue M, Asheville, Carolina del Norte) hasta un peso en seco
estable se alcanzó después de 48 horas. La relación entre el húmedo a
peso seco fue calculado.
1. Roumen RM, Redl H, Schlag G, Zilow G, Sandtner W, Koller W,
Hendriks T, Goris RJ: Inflammatory mediators in relation to the
development of multiple organ failure in patients after severe blunt
trauma. Crit Care Med 1995, 23:474-480[CrossRef][Medline]
2. Czura CJ, Friedman SG, Tracey KJ: Neural inhibition of
inflammation: the cholinergic anti-inflammatory pathway. J Endotox Res
2003, 9:409-413[CrossRef]
3. Harbrecht BG, Billiar TR: The role of nitric oxide in Kupffer
cell-hepatocyte interactions. Shock 1995, 3:79-87
4. Sitio web:
Hecho por:
Willson A Mendoza C.

Proceso para la propagación de microplanta mediante el aumento de formación de brotes múltiples

La presente invención se refiere a un proceso para la propagación
clonal de plantas por la formación de brotes múltiples a partir de
cultivos de tejidos de órganos.
Métodos generales para la propagación de plantas mediante cultivos de
tejidos son bien conocidos y han sido ampliamente descritos en la
literatura. Véase, por ejemplo, la extensa revisión titulada "Planta
propagación a través de Cultivos de tejidos", por T. Murashige, Ann.
Rev. Plant Physiol., 25, 135-166 (1974). Descripción de las
condiciones de utilizarse para la propagación de diversas plantas,
incluidos los medios, la temperatura, condiciones de luz, y los tipos
de cultivos utilizados se refieren a ellos en detalle.
El maíz húmedo proceso de molienda también es bien conocida y ha sido
ampliamente descritos en la literatura. Véase, por ejemplo, el
capítulo titulado "Almidón" de RL Whistler y JR Daniel, comenzando en
la página 492 del vol. 21 de Kirk-Othmer: Encyclopedia of Chemical
Technology, Third Edition, John Wiley & Sons, Inc., Nueva York (1983).
Otros cereales, como el trigo y el sorgo, también puede ser sometido
al proceso de molienda en húmedo.
Cuando el maíz es sometido al proceso de molienda en húmedo, el grano
es primero empapado en agua tibia, que por lo general contiene una
pequeña cantidad de dióxido de azufre. Cuando el trigo es sometido al
proceso de molienda en húmedo, dióxido de azufre no es ordinariamente
añadido a thewater, puesto que destruye la vitalidad del gluten de
trigo. Después de remover el grano, la solución acuosa residual que
contienen diversas sustancias que se han lixiviado fuera del grano se
refiere a menudo como Steepwater. Como se usa aquí, el término
"Steepwater" también se utiliza para incluir la solución que se ha
concentrado por evaporación y Steepwater a los sólidos que permanecen
cuando la evaporación se lleva a cabo hasta su finalización.
En la práctica de esta invención, el Steepwater se mezcla con los
medios de comunicación de nutrientes en la que se cultivan los
cultivos de tejidos. De alrededor de 0,05 g a alrededor de 5 g de
Steepwater sobre una base de extracto seco, se añade por litro de
medio. Esto corresponde a amedium que contienen de un 0,01% a
alrededor del 1% de Steepwater comerciales, ya que Steepwater
comerciales, a veces denominado macerado de maíz, es de
aproximadamente 50% de agua. Una concentración preferida de
Steepwater en el medio es de alrededor de 0,5 g a alrededor de 5
Steepwater GOF en una base de extracto seco por litro de medio.
Un Steepwater particularmente deseable que se utilizará en el proceso
de esta invención se obtiene sometiendo Steepwater comercial de
ultrafiltración. Un producto adecuado es el retenido obtenidos cuando
el material se procesa a través A1000-molecular de la membrana de
corte de peso a permear un ratio de 9:1 y retenido.
Las plantas que pueden propagarse de conformidad con la presente
invención son plantas de interior, arbustos decorativos y ornamentales
y árboles, y los cultivos agrícolas y árboles, incluyendo pero no
limitado a: orquídeas, helechos, crisantemos, patatas, lirios, lenteja
de agua, trébol, y la manzana, almendra , pinos y árboles de papaya.
Los siguientes ejemplos ilustran algunas realizaciones de la presente
invención. Salvo indicación contraria, todas las proporciones y
porcentajes se proporcionan sobre la base de peso.

Un número de plantas se propagan comercialmente por el método de
cultivo de tejidos. Según este método seleccionado los tejidos de la
planta deseada se cultivan en un medio que causa la multiplicación de
los tejidos. Estos tejidos se multiplican dividediendo las divisiones
se cultivan en otros medios, que provocan aumento rápido de los
órganos y otras estructuras, en última instancia, dando lugar a
completar las plantas regeneradas.
La regeneración de plantas se puede conseguir de los sistemas de
células organizadas, como brotes, tallo segmento, disparar punta,
meristemas, y las culturas de otros órganos. La regeneración también
se puede lograr utilizando sistemas no organizados, tales como los
callos y la suspensión-culturedcells. Desde verdaderos clones de una
planta son más fácilmente obtenidos de plantas regeneradas por medio
de brotes axilares de los sistemas organizados, estos sistemas se
suelen utilizar como material de partida para la propagación
microplanta comercial.
La eficiencia de la propagación de plantas por medio de la formación
de brotes múltiples de sistemas organizados depende de la formación
rápida de un número de brotes en el sistema. La presente invención
está basada en un descubrimiento de un proceso para aumentar therate
en que los brotes se producen a partir de los sistemas organizados.
Además, el proceso de esta invención, se mejora enormemente la tasa de
formación de las raíces y otras estructuras, lo que permite acelerar
la tasa de formación completa de las plantas regeneradas.
Resumen de La invención
De acuerdo con esta invención, es siempre un proceso para aumentar la
tasa de formación de brotes en la propagación de plantas mediante
cultivo de tejidos que comprende el cultivo de tejidos en un medio de
cultivo que comprende.
Además, están dotados, de conformidad con la presente invención, es
un proceso para la propagación de una planta de la patata, que
comprende las etapas de:
el cultivo de brotes de la planta de la patata en los medios de
propagación del nodo que comprende Steepwater hasta la producción de
brotes múltiples nodos; cortar el material cultivado en secciones,
cada una de dichas secciones que contiene un solo nodo, y subcultivo
cada sección que contiene un solo nodo en los medios de propagación
del nodo que comprende Steepwater para producir copias múltiples de la
planta de la patata.
Culturas disparar Papa se iniciaron desde ápices eliminado de "ojos"
de los tubérculos de patata. Ápices extirpada, compuesto por las
cúpulas apical acompañada de 4 - a 6-primordios foliares, fueron
colocados en los medios de comunicación de iniciación disparar en la
Tabla I. Cuando thesecultures había producido 4 a 8 nodos, segmentos
que contienen los nodos individuales fueron separados y cultivan en
medios de propagación ganglionar . La composición de los medios de
propagación ganglionar fue similar a los medios de comunicación
disparar iniciación salvo que el ácido acético kinetina andindole se
omitieron y 100 mg por litro de i-inositol, 0,17 g por litro de NaH 2
PO 4 ⋅ H 2 O y cantidades variables de Steepwater se han añadido.
Steepwater está disponible de CPC International Inc., Englewood
Cliffs, NJ, como E801 ARGO.RTM.Steepwater. La muestra utilizada tenía
un pH de 4,6 y contenía 52,5% de sólidos secos. El análisis mostró
que sobre una base de extracto seco que contiene: nitrógeno total,
8,7%; aminoácidos, el 19,0%, ácido láctico, un 28,8%, P total, 9,9%,
ácido fítico, un 9,5%, cenizas, 18,6%, azúcares reductores, 1,8 % y
menos de 10 partes por millón (ppm) de metales pesados.
• El-Ashwah et al., 1980, Chem. Abstr. 92: # 162149g
• Brown et al., 1985, Biol.. Abstr. 81 (5): # 42176
• Lewis et al., 1983, Biol.. Abstr. 76 (12): # 9113
• Sitio Web:
Hecho por: Willson A Mendoza C.

Formación Capilar de Andamios de Polímeros Micro Fabricados

Formación Capilar de Andamios de Polímeros Micro Fabricados
El campo de la ingeniería de tejidos ha experimentado un rápido
crecimiento durante la última década, debido a los avances en campos
tan diversos como la biología celular, química de polímeros, y la
micro fabricación de la tecnología .Los primeros éxitos se han
reportado en el cultivo y la expansión de las células para formar y
sustituir tejidos como la piel, huesos y cartílagos. Aunque estas
solicitudes han sido muy Exitosas y han tenido importantes beneficios
clínicos, el máximo potencial de la ingeniería tisular y la cual se
hará realidad cuando la tecnología se aplica a la generación de
tejidos complejos, como los órganos vitales.
Esta Investigación aborda la aplicación de la tecnología de micro
fabricación hacia la ingeniería de los órganos vitales que requieren
un suministro de sangre.
El principal desafío para la ingeniería de tejidos de órganos vitales
es la exigencia de un aporte vascular intrínseco para la transferencia
de nutrientes y metabolitos. En un método, las células son
cosechadas y ampliado en un polímero biodegradable del andamio que se
ha construido a
Espejo de la geometría del tejido en la macro-escala, pero no en la
Polímeros Micro Fabricados:
Recientemente de una manera muy emocionante el progreso ha sido
reportado en el uso de los factores angiogénicos para promover los
vasos sanguíneos la formación. Otro instrumento para promover la
formación de vasos sanguíneos es de micro fabricación la tecnología,
que puede ser usado para estructuras de precisión micromáquinas como
los capilares de andamios poliméricos. Estos vasos sanguíneos
pequeños de plantillas puede ser sembrada con endotelial las células
como el primer paso en la formación de un suministro vascular de la
ingeniería tisular de órganos.

El núcleo la tecnología para este proceso es de sistemas micro
electromecánicos (MEMS) , en que las plantillas de la estructura de
órganos son micro fabricados en moldes de maestro y luego transferido
en polímeros biocompatibles mediante técnicas de moldeado réplica .El
director toma la ventaja de la tecnología MEMS sobre los métodos
anteriores para la producción de la ingeniería de tejidos andamios,
como los de Three-Dimensional Printing (3DP) , es la capacidad de MEMS
para producir función de las órdenes de los tamaños mínimos de
magnitud menor que 3DP. El proceso comienza con la la generación de
un modelo de dinámica de fluidos que reproduce la fisiología del flujo
sanguíneo en el objetivo de
Órgano, y que representa la reología compleja en la sangre en la
sangre no lineal y de dos fases composición. Este modelo genera
litográfica plantillas, que se utilizan para el patrón de la red de
vasos sanguíneos en el proceso de micro. Master moldes son producidos
a partir de entonces métodos de micro de alta relación de aspecto, por
lo general ya sea por el silicio grabado o por una gruesa acción de
los procesos de fotoprotección.
Películas de polímeros se echan en los moldes maestros, y se integran
para formar de espesor, scaffolds tridimensionales para la siembra de
células y la expansión. Una vez que los andamios han sido formado,
las células endotelial es se introducen a través de la siembra
dinámica en la red de microfluídicos.
Anteriores experimentos de siembra de células demostrar apego éxito y
la proliferación de células endoteliales de a lo largo de los canales
de tan sólo 15 micras de diámetro.

Esta investigación representa el primer paso en el desarrollo de un
nuevo micro fabricación la tecnología para la ingeniería de tejido
Réplica de moldeo biocompatible y polímeros biodegradables en el
silicio de alta definición micro mecanizados sustratos se ha
demostrado que producción de andamios susceptibles de ser sembrados
con células endoteliales de forma casi confluentes cerrado de canales.
Mientras que las células se han introducido en micro canales para
clasificar o para el análisis, que no son típicamente cultivados a
largo plazo en los dispositivos de micro fluidos. Hemos logrado
cabeza de serie y los cultivos de células endoteliales en los canales
de microfabricated por períodos de hasta cuatro semanas, Demostrando
que las células con éxito adjuntar, proliferan y migran en canales
cerrados con geometrías pequeñas. Este es un hito crucial hacia el
objetivo final de la fabricación de microvasculatura y permitir el
desarrollo de la mayor parte de ingeniería de órganos y tejidos.
1. R. Langer y JP Vacanti, "Ingeniería de tejidos", Science, 260, 920 (1993).
2. JP Vacanti y R. Langer, "La ingeniería de tejidos: el diseño y la
fabricación de la vida
dispositivos de reemplazo para la reconstrucción y el trasplante ",
Lancet 354 (Suppl 1),
32 (1999).
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